细菌效应蛋白调控宿主细胞信号研究
发表单位:上海交通大学
解决问题:使用SPR技术是为了定量分析BepE-BID1蛋白与含磷脂酸的脂质体之间的结合亲和力。
实验方法:将BepE-BID1蛋白固定在MetaSPR芯片表面;使用HBS-ET缓冲液稀释PC、PC:POPA和PC:PtdIns4P脂质体;将脂质体溶液注入芯片通道,实时监测结合信号。
实验结果:BepE-BID1与含POPA的脂质体表现出明显的结合亲和力约为349nM,而与纯PC或含PtdIns4P的脂质体未检测到显著结合。
大黄酸共组装调控与肿瘤治疗
发表单位:华中科技大学
解决问题:使用SPR技术是为了测定TPBBT与大黄酸之间的结合亲和力,评估其共组装过程中的分子相互作用强度。
实验方法:将TPBBT固定于传感芯片表面,使大黄酸溶液流过芯片表面,实时监测结合与解离过程,通过拟合结合曲线计算解离平衡常数。
实验结果:结果显示TPBBT与大黄酸的K,值为69uM,表明两者之间存在中等强度的亲和力,这为其共组装形成稳定J聚集结构提供了分子作用基础。
靶向LRP1增强抗肿瘤免疫力研究
发表单位:中国医学科学院生物技术研究所
解决问题:使用SPR技术是为了直接测定DS与LRP1β结构域之间的结合亲和力,验证DS是否直接结合LRP1并量化其结合强度。
实验方法:将重组人His-LRP1β蛋白固定于抗His标签传感芯片表面,使不同浓度的DS溶液流过芯片表面,实时监测结合与解离过程,通过拟合结合曲线计算解离平衡常数。
实验结果:结果显示DS与LRP1β的KD值为9.69uM,表明两者之间存在较强的直接结合亲和力,这为DS通过靶向LRP1发挥免疫调节作用提供了直接的分子互作证据。
破解肠道屏障功能评估难题
发表单位:南京师范大学
解决问题:一种基于超表面等离激元共振比色传感器(MetaSPRCS)的芯片系统,用于实时、无标记、高通量监测肠道细胞屏障的动态变化。
实验方法:将芯片集成至96孔板并与显微镜联用;通过实时成像与人工智能辅助图像处理,监测细胞在乙醇损伤和二氢槲皮素(DHQ)修复过程中的SPR信号变化。
实验结果:
该系统能实时监测肠道屏障的形成、损伤与修复过程;
对低浓度乙醇(2.5%)损伤的检测灵敏度高于传统CCK-8法;
成功评估了DHQ的修复效果,并在动物实验中验证了其剂量依赖性的修复作用,建立了体外体内剂量转换关系。