通过SDS-PAGE电泳按分子量分离蛋白质,转膜至PVDF或NC膜,使用特异性一抗识别目标蛋白,二抗结合并显色,实现蛋白的定性和定量检测。
样品要求
细胞样品(≥10^6细胞)或组织样品(≥20 mg)
目标蛋白抗体信息
内参蛋白选择(GAPDH、β-actin、β-tubulin等)
实验设计(处理条件、对照组)
可选:已知阳性/阴性对照
服务周期
2-4个工作日(标准检测);复杂检测5-7个工作日
常见问答
Western Blot的检测灵敏度如何?
标准WB可检测纳克级别的蛋白,通过优化抗体浓度、延长曝光时间、使用高灵敏度底物等方法可进一步提高检测灵敏度。
如何选择合适的抗体?
建议选择经过验证的抗体,查看文献引用情况,进行抗体特异性测试,并选择适合的抗体稀释比例。
WB结果如何定量分析?
通过内参蛋白(如GAPDH、β-actin)进行标准化,使用ImageJ等软件进行灰度值定量,并进行统计学分析。