微量热泳动(MST)是一种定量生物分子间相互作用的强大技术。通过精确的荧光检测,结合灵活灵敏的热泳动,MST提供了一种灵活、强大和快速测量分子间相互作用的方法。当进行MST实验的时候,样品由红外激光加热产生一个微观的温度梯度场,再通过共价结合的荧光染料或色氨酸自发荧光来监测和定量分子的定向运动。应用范围包括小分子的结合行为,蛋白与蛋白之间的相互作用以及蛋白复合体之间的相互作用。
采用MST(MicroScale Thermophoresis)微量热泳动技术,定量分析分子间相互作用。实验时对互作分子中的一个分子进行荧光标记,使之成为非常灵敏的标签分子,在MST技术中称之为Target;与之互作的另一个分子称之为Ligand。
样品要求
样品信息样品纯度80%(可接受较低纯度)
荧光标记或内源荧光
样品用量极少(通常<10 μg)
缓冲液要求
预期结合亲和力范围
服务周期
2-5个工作日(标准分析);复杂分析5-10个工作日
常见问答
MST的主要优势是什么?
MST样品用量极少(<10 μg),可在接近生理条件下检测,适用于复杂生物样品,无需固定化,检测范围广(pM-mM)。
是否必须进行荧光标记?
通常需要荧光标记,但蛋白质的内源荧光(色氨酸)也可用于无标记检测,或使用荧光配体进行反向滴定。
MST与其他技术相比有何特点?
MST样品用量最少,可在溶液中检测,适合膜蛋白和复杂样品,但需要荧光标记。与SPR/BLI互补使用效果更佳。