表面等离子共振(SPR)

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技术服务详情

利用表面等离子共振现象检测分子结合过程,通过监测芯片表面折射率变化实时记录分子结合和解离过程,获得结合亲和力(KD)、结合速率常数(ka)和解离速率常数(kd)等动力学参数。


样品要求

样品信息:配体和/或分析物不能含有放射性、传染性或其他有害的成分。配体蛋白(标记芯片)

1.纯度大于90%,浓度大于0.5μg/μL,提供50μg以上。

2.配体蛋白缓冲液尽量避免Tris等带有伯胺基团的试剂,以及金属离子等,溶液避免颗粒或絮状沉淀。如果一定需要加入,需提供准确的浓度。


分析物(流动相)

1.纯度大于90%,浓度大于0.5 μg/μL,提供冻干粉最好,提供200μg以上,小分子提供1-5 mg。

2.溶剂最好不含有有机化合物,如:SDS,Triton X-100等表面活性剂,甘油,DMSO等。如果一定需要加入有机溶剂,就尽量提供高浓度的分析物,通过稀释可以降低其含量比。

3.尽可能不含有海藻糖,BSA,蔗糖等保护剂。如果一定需要加入,需提供准确的浓度,以及尽可能提供高浓度含分析物原液,以便通过稀释降低其含量比,稀释后上样终浓度中抗原抗体保护剂浓度≦0.1%即可。

注:如果是原料干粉,请告知是否能溶解于10 mM HEPES(pH 7.4);若为冻干粉,请告知冻干前的缓冲液,如果配体的保存溶液不适于芯片固定时,我们将不得不对样品进行缓冲液置换;此时需要您提供额外的样品并进行收费。


服务周期

1-3个工作日(标准分析);复杂分析3-7个工作日


常见问答

SPR检测的灵敏度如何?

SPR可检测纳摩尔到皮摩尔级别的结合亲和力,检测限通常在1-100 nM范围内,具体取决于分子大小和结合特性。


需要多少样品量?

通常需要配体50-200 μg,分析物10-100 μg,具体用量取决于分子大小、纯度和实验设计。


可以检测哪些类型的分子?

可检测蛋白、抗体、小分子、核酸、糖类等多种生物分子,分子量范围从几百道尔顿到几百万道尔顿。